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chimerx新產品NXT Taq PCR試劑盒

更新時間:2020-03-24      點擊次數:1351

 

chimerx新產品NXT Taq PCR試劑盒


CHIMERx現在提供了一個熱啟動PCR試劑盒,旨在縮短PCR循環時間而又不影響產量或性能。NXT Taq PCR Kit包含現成的預混液,其中包括Hot Start NXT Taq DNA聚合酶,反應緩沖液,MgCl2和dNTP。還包括無核酸酶的水和10X彩色加載溶液。NXT Taq PCR Kit可以與任何熱循環儀一起使用。

NXT Taq PCR試劑盒

chimerx 1108

 

$ 56.00

    快速概述

    熱啟動PCR試劑盒,設計用于在任何熱循環儀上進行快速循環PCR,而不會影響產量或性能

    細節

    提供的試劑

    NXT  Taq PCR預混液(2x)包含:

    • 熱啟動NXT Taq DNA聚合酶 
    • 反應緩沖液
    • 氯化鎂2
    • dNTPs

    水,無核酸酶的
    10X彩色溶液

    描述

    •  llows以獲得寬范圍的PCR產物的至多4個kb和從附加型或復雜的基因組DNA為10kb,分別
    • 即用型溶液,包含熱啟動  NXT  Taq DNA聚合酶,反應緩沖液,MgCl 2  和dNTP
    • 專為任何熱循環儀上的快速循環PCR設計
    • 縮短PCR循環時間而不會影響產量或PCR性能
    • 不需要重新設計引物
    • 隨附10X Color Load溶液,可直接在凝膠上加載PCR反應
    • 在72°C下復制DNA,并在95°C下顯示40分鐘的半衰期
    • 包含5'→3'核酸外切酶活性
    • 缺乏3'→5'核酸外切酶活性
    • 在3'末端添加額外的“ A”
    • 抗Taq抗體在中等溫度下抑制聚合酶活性
    • 在初始變性步驟中,聚合酶活性得以恢復。

    應用領域

    • Taq DNA聚合酶和抗Taq抗體之間形成復合物,構成了熱啟動PCR的基礎,可方便地進行室溫反應。
    • 與常規PCR組裝方法相比,熱啟動PCR可以提高PCR反應的特異性,靈敏度和產率。

    筆記

    • 不要使用大于20μl的反應體積,因為這會干擾獲得成功結果所需的宜溫度梯度
    • 使用前解凍,輕輕渦旋并短暫離心NXT Taq PCR Master Mix(2x),引物,DNA模板,以避免鹽濃度的局部差異
    • 退火和延伸步驟每100 bp分別需要5 s和3 s
    • 在室溫下設置PCR反應
    • 底漆可以單獨添加,也可以作為預先準備的底漆混合物添加
    • 渦旋樣品并短暫旋轉
    • 反應可以在室溫下放入熱循環儀中
    • 使用10X Color Load Solution可使PCR反應直接加載到凝膠上,而無需事先添加凝膠加載緩沖液。10X Color Load Solution包含凝膠加載試劑和兩種在電泳過程中分離的跟蹤染料(紅色染料和黃色染料)。在1%瓊脂糖凝膠中,紅色染料的遷移速率與600 bp DNA片段的遷移速率相同,而黃色染料的遷移速率高于20 bp。該染料不干擾大多數下游酶的應用,但是建議在酶操作之前純化PCR產物。
    • 在大多數情況下,無需在PCR反應中添加添加劑。對于某些困難的目標,例如:富含GC的序列,可以添加具有復雜二級結構添加劑的序列(例如DMSO)以改善擴增。使用濃度為2-8%的DMSO。如果需要,建議的起始DMSO濃度為3%
    • 作為使用多少模板DNA的一般指南,請從少10 4  個目標序列拷貝開始,以25-35個周期獲得信號(即1μg1 kb ds DNA等于9.1 x 10 11分子,1μg的大腸桿菌基因組DNA等于2 x 10 8分子,1μg人基因組DNA等于3 x 10 5分子)

    儲存條件

    在-20°C下儲存
    產品在干冰上運輸

    分類目錄

    聚合酶,嗜熱DNA聚合酶

     

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